摘要:采用胰酶消化法获得三角帆蚌( Hyriopsis cumingii )外套膜细胞,用Fluo-3/AM 荧光标记技术和激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)检测外套膜内外表皮细胞在静息状态下细胞的游离Ca2+浓度及不同浓度维生素D3(VD3)孵育后的外套膜细胞的Ca2+的动态情况。结果表明,未添加VD3(1.25 mmol/L Ca2+)时,外套膜外表皮细胞的Ca2+荧光强度显著高于内表皮细胞内的Ca2+( P <0.05)。在添加不同浓度VD3后,内表皮细胞与外表皮细胞内Ca2+浓度变化趋势一致,表现为细胞内Ca2+沉积量的变化是随着VD3浓度的增大而增大,其中,对照组与添加50 IU/L组差异不显著( P >0.05);当添加浓度为100 IU/L时,与对照组和50 IU/L组差异显著( P <0.05);当添加组浓度达到500 IU/L时,与前3组有显著差异( P <0.05);当添加的浓度增大到1 000 IU/L后与500 IU/L组差异不显著( P >0.05),但与其他组均存在显著差异( P <0.05)。本实验为外套膜细胞的钙代谢机制研究提供了实验依据。